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使綠螢光能活體標記於類心臟之DNA新組合及其製備的方法 |
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| ‧ 專利名稱 |
使綠螢光能活體標記於類心臟之DNA新組合及其製備的方法 |
| ‧ 專利證書號 |
I 245799
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| ‧ 專利權人 |
國立臺灣大學 |
‧ 專利國家
(申請日) |
中華民國 (2002/01/17)
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| ‧ 發明人 |
蔡懷楨, 黃秋茹, 蕭崇德, |
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| 技術摘要： |
本發明提供一種使魚類心臟能專一性發螢光之技術，以作為日後研究心臟相關基因與功能，以及進行藥物篩選與基因治療之材料及其相關方法。此方法包括了將含有螢光蛋白基因的DNA組合片段轉殖進入魚類染色體，以在魚類心臟中具有專一性之螢光表現。其中，此轉殖程序至少包含了下列步驟：首先將魚類之染色體DNA抽取出來，並利用限制酵素進行剪切；接著再接合適當的適應子，進行二次的聚合脢連鎖反應，以放大目標DNA片段。此經過放大的DNA片段經過定序步驟，確認其為魚類第二類心臟肌凝蛋白輕鏈(cardiac myosin light chain 2, cmlc2)基因後，接著建構一表現質體。此質體包含了魚類第二類心臟肌凝蛋白輕鏈基因上游調控序列(upstream regulatory region)、部分結構序列、螢光蛋白的cDNA以及在這整個組合序列兩端所接上之腺聯病毒(adeno- associated virus)末端重複序列(inverted terminal repeats)。最後，將線性化後之質體經顯微注射而轉殖進入魚類受精卵中並繼續培養，然後在螢光顯微鏡下觀察，可篩選到能在心臟具有專一性發螢光，且繼代穩定遺傳此特性之轉殖動物品系。
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聯繫方式 |
| 聯絡人：
研發處產學合作總中心 |
電話：
(02)3366-9949 |
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| 地 址：
10087台北市中正區思源街18號 臺大水源校區思源樓3樓 |
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