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 使綠螢光能活體標記於類心臟之DNA新組合及其製備的方法
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刊登日期：2014/05/21 |
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| ‧ 專利名稱 |
使綠螢光能活體標記於類心臟之DNA新組合及其製備的方法 |
| ‧ 專利證書號 |
I 245799
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| ‧ 專利權人 |
國立臺灣大學 |
‧ 專利國家
(申請日) |
中華民國 (2002/01/17)
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| ‧ 發明人/PI |
蔡懷楨,黃秋茹,蕭崇德,
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| ‧ 單位 |
分子與細胞生物學研究所
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| ‧ 簡歷/Experience |
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| 技術摘要 / Our Technology： |
本發明提供一種使魚類心臟能專一性發螢光之技術，以作為日後研究心臟相關基因與功能，以及進行藥物篩選與基因治療之材料及其相關方法。此方法包括了將含有螢光蛋白基因的DNA組合片段轉殖進入魚類染色體，以在魚類心臟中具有專一性之螢光表現。其中，此轉殖程序至少包含了下列步驟：首先將魚類之染色體DNA抽取出來，並利用限制酵素進行剪切；接著再接合適當的適應子，進行二次的聚合脢連鎖反應，以放大目標DNA片段。此經過放大的DNA片段經過定序步驟，確認其為魚類第二類心臟肌凝蛋白輕鏈(cardiac myosin light chain 2, cmlc2)基因後，接著建構一表現質體。此質體包含了魚類第二類心臟肌凝蛋白輕鏈基因上游調控序列(upstream regulatory region)、部分結構序列、螢光蛋白的cDNA以及在這整個組合序列兩端所接上之腺聯病毒(adeno- associated virus)末端重複序列(inverted terminal repeats)。最後，將線性化後之質體經顯微注射而轉殖進入魚類受精卵中並繼續培養，然後在螢光顯微鏡下觀察，可篩選到能在心臟具有專一性發螢光，且繼代穩定遺傳此特性之轉殖動物品系。
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| 專利簡述 / Intellectual Properties： |
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聯繫方式 / Contact： |
| 臺大產學合作總中心 / Center of Industry-Academia Collaboration, NTU |
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| Email：ordiac@ntu.edu.tw |
電話/Tel：02-3366-9945 |
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